НЕЭТЕРИФИЦИРОВАННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ, ИНСУЛИН, АЛЬБУМИН МЕЖКЛЕТОЧНОЙ СРЕДЫ И ПАТОГЕНЕЗ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА

Согласно филогенетической теории общей патологии, система ЛП на ступенях филогенеза раздельно в гидратированной, межклеточной среде переносит к клеткам гидрофобные НЖК, которые двойных связей в цепи атомов углерода (С=С, ДС) не имеют, моно-ненасыщенные ЖК с одной ДС (МЖК), ненасыщенные ЖК с 2—3 ДС (ННЖК) и полиеновые ЖК с 4—6 ДС (ПНЖК). Столь физиологичное (не химическое) деление нами ЖК основано на том, что:

  • а) ни приматы, ни человек не могут из ННЖК синтезировать ПНЖК;
  • б) функция in vivo у них разная — у первых структурная, у вторых — регуляторная. Однако и те и другие являются эссенци-альными (незаменимыми), и их необходимо получать с пищей как экзогенные ЖК. Химики же делят ЖК на НЖК, МЖК и П НЖК.

На ступенях филогенеза последовательно сформировалась вначале функция ЛПВП, далее произошло формирование ХМ в ПС эн-тероцитов и далее Л П Н П. Последними в филогенезе стали функционировать инсулинозависимые Л ПОН П; в гидратированной межклеточной среде и в кровотоке они переносят только НЖК + МЖК в форме неполярных эфиров со спиртом глицерином — ТГ и только к зависимым от инсулина филогенетически поздним клеткам. Ими являются поперечнополосатые, скелетные миоциты, синцитий кардиомиоцитов, подкожные адипоциты, перипортальные гепатоциты и оседлые макрофаги Купфера в печени.

В зависимости от того, какая ЖК этерифицирована со вторичной спиртовой группой глицерина в sn-2, которую in vivo не гидролизует ни одна внеклеточная липаза, мы предложили структурно и функционально разделить ТГ на пальмитиновые, олеиновые, линолевые и линоленовые. Концентрация их в межклеточной среде, плазме крови выше, чем иных — стеариновых, лауриновых, миристиновых, пальмитолеиновыхТГ. И если НЖК, МЖК и ННЖК липопротеины переносят в форме неполярных ТГ, то неполярной формой для ПНЖК являются эфиры с иным, более гидрофобным, одноатомным, вторичным спиртом холестерином (ХС); это полиеновые эфиры

ХС (поли-ЭХС). Ни пальмитиновые, ни олеиновые Л ПОНП физиологично в лпнп не превращаются; все их поглощают инсулинозависимые клетки путем позднего в филогенезе апоЕ/В-100 эндоци-тоза. Физиологично в ЛПНП превращаются только линолевые и ли-ноленовые Л ПОНП. Происходит это в процессе того, как белок, переносящий полиеновые эфиры холестерина (БППЭХ), переносит их в форме поли-ЭХС из Л П В П в состав только линолевых и лино-леновых ЛПОНП; поли-ЭХС — это этерифицированные спиртом ХС экзогенные ПНЖК. ЖК в форме ТГ и поли-ЭХС клетки поглощают раздельно, рецепторно: ЛПОНП путем апоЕ/В-100 эндо-цитоза, ЛПНП — путем апоВ-100. У части видов животных поглощение клетками Л ПВП происходит путем апоЕ/А-1 эндоцитоза.

В биологической функции трофологии (питания), в биологической реакции экзотрофии (после еды), основное количество ЖК (НЖК + МЖК) клетки активно поглощают путем инсулинзависимого эндоцитоза в форме ТГ в составе пальмитиновых и олеиновых ЛПОНП. ПНЖК в форме поли-ЭХС клетки пассивно поглощают из Л ПВП. В биологической же реакции эндотрофии (при отсутствии пищи) большинство клеток поглощают ЖК в форме полярных НЭЖК из комплексов с липидпереносящим белком альбумином. С самых ранних ступеней филогенеза, еще у древних Архей, которые сформировали митохондрии, клетки активно поглощают полярные НЭЖК при действии столь же раннего транспортера — СЭ36 транс-локазы ЖК.

Цитоплазма всех клеток содержит всегда только следовые количества ЖК в неполярной форме эфира с филогенетически ранним тиоспиртом коэнзимом-А; это активированная форма ацил-КоА. Образование эфирной (тиоэфирной) связи (С-Б-С) между спиртом коэнзимом-А и ЖК активирует фермент ацил-КоА-синтаза. Градиент концентрации межклеточная среда —> цитоплазма клеток для ЖК всегда высок, во много раз выше, чем для глюкозы. В форме ацил-КоА все ЖК поглощают митохондрии; в форме ацетил-КоА, после окисления в митохондриях, активированная уксусная кислота поступает в цикл Кребса.

НЭЖК в крови в биологической реакции экзотрофии (после еды) и эндотрофии (при отсутствии приема пищи)

Во время биологической реакции экзотрофии (после приема пищи, при активной функции инсулина) и в биологической реакции эндотрофии (вне приема пищи, вне действия инсулина) количество и состав НЖК, МЖК и ННЖК в пуле НЭЖК плазмы крови являются разными. В биологической реакции экзотрофии это НЭЖК, которые освобождаются при гидролизе пальмитиновых и олеиновых ТГ из состава одноименных ЛПОНП при действии постгепариновой липопротеинлипазы (ЛИЛ). Количество в кровотоке НЭЖК и их качественный состав определен многими факторами.

  • 1. Преобладание в крови секретированных гепатоцитами пальмитиновых или олеиновых ТГ в одноименных Л ПОН П. Гидролиз олеиновых ТГ при действии постгепариновой Л ПЛ происходит со значительно большей константой скорости реакции, чем пальмитиновых ТГ, особенно таких ТГ, как пальмитоил-пальмитоил-олеат глицерол (ППО) и олеил-пальмитоил-пальмитат (ОПП); ТГ как пальмитоил-пальмитоил-пальмитат (ППП) постгепариновая ЛПЛ практически не гидролизует. Более медленно постгепариновая ЛПЛ гидролизует и олеиновые ТГ как пальмитоил-олеил-пальмитат глицерол (ПОП).
  • 2. Содержание ХС в полярном монослое ЛПОНП на поверхности массы связанных с апоВ-100 ТГ; при высоком отношении ХС/фос-фатидилхолин (ХС/ФХ) монослой, обладая высокой гидрофоб-ностью, практически разобщает фермент в гидрофильной среде плазмы крови от субстрата — ТГ в ЛПОНП; биодоступность субстрата для фермента становится низкой. Липолиз пальмитиновых ТГ, если количество одноименных ЛПОНП в крови не увеличено, происходит нормально, но физиологично медленно. Пальмитиновые ЛПОНП длительно не формируют лиганд, их не столь быстро, как олеиновые, поглощают инсулинозависимые клетки при апоЕ/В-100 эндоцитозе. Если пальмитиновых ЛПОНП в крови афизиологично много, они, медленно увеличивая гидратированную плотность, превращаются в итоге в афизиологичные, малые, пальмитиновые

лпнп.

  • 3. Синтез ХС, который вместе с ФХ формирует полярный монослой ХС/ФХ в состав ЛПОНП, ингибируют статины; они уменьшают количество ХС в монослое, понижают отношение ХС/ФХ, активируют липолиз и снижают гипертриглицеридемию, ХС-ЛПНП и число образуемых ЛПНП; физиологично в крови не бывает ни олеиновых, ни пальмитиновых ЛПНП.
  • 4. В биологической реакции экзотрофии после еды, при высокой секреции инсулина (3-клетками островков, гормон блокирует гидролиз ТГ в подкожных, инсулинозависимых, филогенетически поздних адипоцитах и останавливает освобождение в кровь НЭЖК.
  • 5. Если в пище доминирует пальмитиновая НЖК, пальмитиновые ТГ и одноименные ЛПОНП в крови, если освобождаемых при липо-лизе в крови НЭЖК явно недостаточно для покрытия потребностей in vivo в АТФ, следует нарушение биологической функции гомеостаза.

Согласно биологической функции гомеостаза для каждой из клеток in vivo всегда всего должно быть достаточно. За дефицитом синтеза АТФ, по причине неоптимального субстрата для наработки митохондриями АТФ, следует активация тоже филогенетически ранней биологической функции адаптации, биологической реакции стресса. Так избыток пальмитиновой НЖК после каждого приема пищи формирует in vivo биологическую реакцию стресса, дефицит энергии по причине реализации in vivo митохондриями неоптимального экзогенного субстрата — пальмитиновой НЖК и прогностически, потенциально малоэффективного пальмитинового варианта метаболизма ЖК.

6. Независимо от этиологии биологической реакции стресса, in vivo, в первую очередь, реакция стресса обеспечивает реализацию всех биологических функций; она активирует наработку митохондриями АТФ. Для этого происходит активация синтеза и секреции адреналина; катехоловый амин, филогенетически ранний гуморальный медиатор, активирует гормонзависимую липазу и не в филогенетически поздних подкожных адипоцитах, а в ранних висцеральных жировых клетках (ВЖК) сальника; адреналин усиливает гидролиз ТГ и освобождение в кровь оптимального количества НЭЖК.

Является ли у человека состав ЖК в ТГ одинаковым в филогенетически ранних ВЖК сальника и в поздних подкожных адипоцитах, пока не ясно. В то же время у свиней в ВЖК сальника, в ТГ этери-фицированы преимущественно среднецепочечные С 14:0 миристи-новая и С 12:0 лауриновая НЖК, а в подкожных адипоцитах — длинноцепочечные С 18:1 олеиновая МЖК и С16:0 пальмитиновая НЖК. Константа скорости окисления митохондриями среднецепочечных ЖК существенно выше, чем пальмитиновой НЖК.

7. Казалось бы, выход найден — недостаток НЭЖК в биологической реакции экзотрофии (после каждого приема пищи) компенсирует биологическая реакция стресса, активация освобождения НЭЖК из ВЖК сальника; физиологично это происходит только в биологической реакции эндотрофии. При избытке в пище пальмитиновой НЖК после каждого приема пищи недостаточное освобождение при липолизе полярных НЭЖК афизиологично компенсирует биологическая реакция стресса. При этом адреналин повышает липолиз в ВЖК «не задумываясь», что филогенетически поздний инсулин не может ингибировать липолиз в жировых клетках сальника. И повышение в плазме крови содержания НЭЖК, как это происходит в течение миллионов лет, останавливает поглощение клетками глюкозы, инициируя гипергликемию, гиперинсулинемию и синдром ИР. Заканчивается подобная компенсация биологической функции трофологии биологической реакцией стресса, активацией биологической функции адаптации. В принципе, подобная афизиологичная компенсация закончится истощением функции (3-клеток островков Лангер-ганса с формированием сахарного диабета первого типа, дефицитом синтеза in vivo инсулина.

Однако недостаток субстратов (НЭЖК) для наработки митохондриями АТФ при формировании пальмитинового варианта метаболизма ЖК является далеко не единственной причиной формирования ИР. Во многих ситуациях in vivo, при которых филогенетически ранний гуморальный медиатор адреналин активирует липолиз в ВЖК с повышением в межклеточной среде концентрации НЭЖК, формируется резистентность к инсулину. Характерно формирование синдрома ИР и для биологической функции эндоэкологии, биологической реакции воспаления, в которой все этапы утилизации in vivo эндогенных флогогенов и экзогенных патогенов сопряжены с затратой энергии. Это относится к утилизации in vivo телец апоптоза, комлексов антиген + антитело, ассоциатов бактериальный токсин липополисахарид + специфичный связующий белок, ферментов цитоплазмы при истечении их из клеток в пул межклеточной среды. При синдроме системного воспалительного ответа, при нарушении биологической реакции метаболизм <-» микроциркуляция всегда развивается синдром ИР. Непосредственным фактором инициирования биологической реакции ИР является длительное повышение в плазме крови содержания НЭЖК.

Динамичные, временные ситуации с развитием ИР являются патофизиологичными, следствием несогласованности процессов регуляции на трех уровнях «относительного биологического совершенства»: на уровне клетки, в ПС клеток и органов и на уровне организма. Важно, чтобы факторы, которые инициируют ИР, не были длительными, тем более постоянными. Во всех ситуациях, когда в плазме крови без «ведома и регуляции» инсулина происходит повышение НЭЖК, формируется синдром ИР; при этом инсулин не в состоянии усилить поглощение инсулинозависимыми клетками глюкозы. Так, при избытке в пище пальмитиновой НЖК, пальмитиновых ТГ и одноименных Л ПОН П в плазме крови, в биологической реакции экзотрофии (после приема пищи) in vivo формируется синдром ИР. Постепенно гипергликемия и гиперинсулинемия становятся характерными и для реализации биологической реакции эндо-трофии, в отсутствии прима пищи, в том числе и натощак.

Более 90% пациентов, которым выставлен диагноз диабета второго типа на основании гипергликемии натощак, данных теста толерантности к глюкозе, гиперинсулинемии и высокого уровня НЭЖК в плазме крови, на самом деле имеют симптом ИР. Основой его является нарушение биологической функции трофологии, функции питания, потребления пищи со столь высоким содержанием пальмитиновой НЖК, транс-форм МЖК и афизиологичной у-7 С 16:1 пальмитолеиновой МЖК, которое не могут физиологично переносить Л П, а клетки не могут поглощать. Миллионы лет на ступенях филогенеза, при жизни в водах трех океанов, содержание в пище пальмитиновой НЖК не было выше 15% всего содержания ЖК в пище.

При современном питании содержание пальмитиновой НЖК в пище может быть выше 50% всего количества ЖК. Даже все вместе лпвп + ЛПНП + ЛПОНП не в силах перенести, а клетки не в состоянии поглотить, физиологично депонировать столь большое ее количество. Большим подспорьем в этом является и «химическое оружие пищепрома» в форме пальмового масла; в нем содержание пальмитиновой НЖК приближается к 50% всех ЖК. В каждой из молекул ТГ в пальмовом масле пальмитиновая НЖК этерифициро-вана в разных позициях ТГ, чаще в sn-lH sn-3.

В биологической функции трофологии (питания) в биологической реакции эндотрофии (внутреннего питания), при отсутствии приема пищи и секреции инсулина, активация гуморальными медиаторами гормонзависимой липазы в ВЖК освобождает в межклеточную среду и кровоток оптимальное количество НЭЖК для покрытия in vivo всех потребностей в энергии. И если в биологической реакции экзотрофии, при приеме пищи, доминирует филогенетически поздний перенос ЖК в форме неполярных ТГ в составе ЛП, то в биологической реакции эндотрофии в межклеточной среде и кровотоке доминирует ранний в филогенезе перенос ЖК в форме полярных НЭЖК. Специфичным белком-переносчиком для полярных, гидрофобных НЭЖК, является альбумин. Основная функция альбумина — перенос к клеткам, главным образом, НЖК + МЖК и в малой мере ННЖК. ПНЖК альбумин связывать и переносить не может. Для этой цели в пренатальном периоде функционирует иной липидсвязывающий белок — а-фетопротеин.

В биологической реакции эндотрофии часть освобожденных из ВЖК сальника НЭЖК поглощают гепатоциты, этерифицируют в состав олеиновых ТГ и секретируют в кровоток. Все олеиновые и пальмитиновые ЛПОНП из крови физиологично поглощают инсулинозависимые клетки путем апоЕ/В-100 эндоцитоза. И если натощак мы находим в плазме крови высокое содержание ХС-ЛПНП и НЭЖК, это на самом деле:

  • а) пальмитиновые ЛПНП, которые остались в крови после последнего приема пищи и
  • б) НЭЖК, которые компенсаторно освобождены из ВЖК сальника в условиях наиболее частого метаболического стресса при недостатке in vivo энергии, при низком уровне синтеза АТФ по причине, наиболее часто, недостаточного количества субстрата — ацетил-КоА в митохондриях.

Альбумин и перенос к клеткам НЖК и МЖК в форме полярных НЭЖК

Альбумин — полифункциональный (неспецифичный) транспортный белок, содержание которого в крови не столь велико. Не совсем ясно, какой из многих лигандов он связывает с наиболее высокой аффинностью, каковы механизмы диссоциации ЖК с альбумином и переход на плазматическую мембрану клеток, какую транспортную функцию белок стал выполнять в филогенезе первой и какие лиганды он начал переносить на ступенях филогенеза позже. Неясно, какие особенности первичной, вторичной структуры позволяют белку переносить в межклеточной среде лиганды, столь разные по мол. массе и гидрофобности.

Альбумин (лат. а1Ьт — белый) — растворимый в воде белок, умеренно растворимый также в концентрированном растворе КаС1, склонный к свертыванию при нагревании (физическая денатурация). Относительная мол. масса составляет ~ 69 (кДа); белок не содержит углеводов. Вещества, которые содержат альбумин (яичный белок), именуют альбуминоидами. Альбумин растворяется в солевых растворах, кислотах и щелочах; при гидролизе распадается на короткие пептиды и аминокислоты; альбумин можно выделить и в кристаллическом виде. Проявляет он высокую способность связывать низкомолекулярные соединения, которые содержат гидрофильные и липофильные (гидрофобные) домены. Наиболее часто в лаборатории и клинике используют альбумин сыворотки крови. Содержат его и иные биологические среды: спинномозговая жидкость, моча, асцитическая жидкость, однако в существенно меньшем количестве.

Альбумин синтезирует гепатоциты как секреторный белок; в печени он составляет большую часть всех белков и около 50% белков в плазме крови. Продолжительность жизни альбумина в сосудистом русле — три недели. Поскольку концентрация альбумина высока, а размеры молекулы невелики, он на 80% определяет осмоляльное, коллоидно-осмотическое давление. Общая площадь поверхности молекул альбумина в плазме крови велика, поэтому он активно исполняет функцию переносчика гидрофобных, нерастворимых в воде веществ, рис. 5.1. Это билирубин, уробилин, ЖК, желчные кислоты, экзогенные вещества — пенициллин, сульфамиды, ртуть, липофильные, гидрофобные гуморальные медиаторы, гормоны, лекарственные препараты: варфарин, фенилбутазон, клофибрат. Одна молекула альбумина может связать несколько молекул билирубина (мол. масса 500 Д). Конкуренцию между лекарствами за «посадочные места» на молекуле альбумина может вызвать увеличение их активности и повышение лечебного действия. Полагают, что на плазматической мембране клеток имеют специфичные рецепторы к альбуминам — альбандины.

Структура АЛБ; молекула состоит из трех одинаковых, относительно

Рис. 5.1. Структура АЛБ; молекула состоит из трех одинаковых, относительно

изолированных доменов

Физиологичный уровень альбумина в сыворотке крови взрослых людей — 35—50 г/л. Для детей в возрасте менее 3-х лет нормальный уровень — в пределах 25—55 г/л. Низкое содержание альбумина (ги-поальбуминемия) характерна для патологии печени, нефротического синдрома, ожогов, энтеропатий с потерей белка, при недоедании, на поздних сроках беременности, при злокачественных новообразованиях. Прием ретинола (витамина А) может повысить уровень белка до субнормальных значений; происходит это и у человека. Повышение уровня альбумина (гиперальбуминемия) может возникать in vivo в результате обезвоживания. Физиологично содержание альбумина ни в кровотоке, ни в межклеточной среде не увеличивается. И даже если концентрация НЭЖК в плазме крови возрастает значительно, и тогда содержание альбумина в ней не возрастает. Это обусловлено тем, что на ранних ступенях филогенеза альбумин задействован в регуляции онкотического давления и функциональном взаимодействии пула внутрисосудистой жидкости с единым пулом межклеточной среды. Его как «кусочек третьего мирового океана приватизировала» каждая из особей, и в нем, как и миллионы лет ранее, продолжают in vivo жить все клетки.

Одна из важных функций альбумина — транспортная; белок переносит ЖК в форме полярных НЭЖК; в малой мере связывает и спирт ХС. Значительная часть Са++ в сыворотке тоже связана с альбумином. При избытке в пище пальмитиновыхТГ, как ППО и ОПП, мы полагаем, при гидролизе их в крови и освобождении пальмитиновой НЖК в форме НЭЖК из sn-1 и sn-З позиций ТГ, пальмитиновая НЖК с высокой аффинностью связывает ионы кальция и магния, выводя их с калом. Мы полагаем, что у взрослых при животной пище (не молочной), перегруженной пальмитиновой НЖК, происходит то, чего столь тщательно избегает биология при метаболизме конечных липидов молока в раннем постнатальном периоде. В конечных липидах — ТГ молока пальмитиновая НЖК этерифипи-рована главным образом в sn-2 пальмитиновых ТГ. Мы полагаем, что повышенное количество пальмитиновой НЖК в форме НЭЖК в кровотоке при избытке мясной пищи (говядина) может стать причиной хронического остеопороза у пожилых пациентов при формировании низкой биодоступности ионов калия и магния для всасывания энтероцитами.

Альбумин может связать гидрофобные и амфифильные лиганды малой мол. массы (< 1000 Д). Выявлен и новый вид патологических изменений в белках: первичная структура не нарушена, однако изменена вторичная и/или третичная структура (конформация, пространственная форма молекулы). Иногда это является результатом загрузки альбумина токсичными продуктами, которые печень и другие органы биологической функции эндоэкологии не успевают выводить (гипербилирубинемия). Однако нередко дело обстоит иначе: перегрузки альбумина метаболитами нет, но изменена конформация (стерическая форма) протеина. Белок с измененной конформацией не может эффективно выполнять транспортную функцию.

В течение длительного времени связывающую способность белка сыворотки крови оценивали путем титрования свободных -SH групп. Позже это определение проводят более современными методами, основанными на использовании флуоресцентного зонда К-35. Этот метод позволяет определить не только общую концентрацию альбумина (ОКА), но и состояние связывающих центров его молекулы; именуют ее эффективной концентрацией альбумина (ЭКА).

Менее значительные изменения в структуре альбумина могут быть вызваны изменением pH среды. С приближением pH к изо-электрической точке белка степень его гидратации, растворимости, вязкость и другие параметры принимают афизиологичные значения. Изоэлектрическая точка альбумина — 4,7. Видимо, подобные значения при pH, практически равном изоэлектрической точке, связаны с изменением конформации белковой молекулы. Установлены пять конформаций альбумина; они могут переходить друг в друга при изменении pH.

Структура и конформация альбумина в переносе НЖК и МЖК

Альбумин — глобулярный белок; синтезируют его гепатопиты в количестве 15—20 г/24 часа. В сосудистом русле содержится 120— 140 г альбумина, во внеклеточном пространстве — 360 г. Время жизни белка in vivo — три недели. Белок представлен полипептидной цепью из 586 аминокислотных остатков. 17 дисульфидных связей (-Б-З-) формируют третичную структуру молекулы и петлевые домены. По длине пептида трижды повторяется сходная первичная последовательность и вторичная структура доменов. Несмотря на большое число дисульфидных связей, молекула является подвижной и способна менять конформацию. Наличие большого числа Э-Э связей, естественно, ограничивает конформационные изменения глобулы. Можно полагать, что большое число ковалентных связей обеспечивает сохранение глобулярной структуры молекулы при связывании разных лигандов; цель — сохранить наименьшую вязкость концентрированного раствора альбумина. Молекула белка — эллипсоид с диаметром 40 и длиной 140 ангстрем. При pH 7,4 отрицательный заряд белка равен 18: молекула имеет 180 титруемых отрицательных зарядов, рис. 5.2.

Раствор альбумина имеет меньшую вязкость, чем эквимольные растворы фибриногена и иных глобулинов. В крови альбумин на 80% определяет онкотическое давление. При патологических состояниях активация катаболизма, продолжительность циркуляции белка в крови, равная трем неделям, может быть изменена. Молекула альбумина способна подвергаться модификации; одна из них — ковалентное взаимодействие глюкозы с аминокислотным остатком лизина в позиции 525. Если физиологично гликированию подвержены несколько процентов молекул альбумина, при сахарном диабете количество возрастает во много раз.

Многие аминокислотные остатки в молекуле белка содержат гидрофобные группы, которые образуют домены, погруженные вглубь молекулы альбумина. Они формируют гидрофобные «карманы», с которыми связываются лиганды — длинноцепочечные ЖК. При этом цепи погружаются в гидрофобную «щель», а гидрофильный карбоксил ЖК остается на поверхности глобулы в ассоциации

Изменение конформации глобулы, формирование трех «щелевых полостей» при связывании первой ЖК (кооперативность связывания). Вид с поверхности (а) и при сечении глобулы (б)

Рис. 5.2. Изменение конформации глобулы, формирование трех «щелевых полостей» при связывании первой ЖК (кооперативность связывания). Вид с поверхности (а) и при сечении глобулы (б)

с водной средой. Размеры гидрофобной щели позволяют белку с высокой мерой аффинности связывать только С16 и С18 НЖК и МЖК. При физиологичных значениях pH карбоксильная группа ЖК заряжена отрицательно. Гидрофобная щель, в которую погружается алифатическая цепь ЖК, сообщается с поверхностью глобулы; в месте контакта расположена группа остатков лизина и аргинина, которые заряжены положительно. Обладая гидрофильной карбоксильной группой, ЖК всегда присутствуют в растворах, хотя их концентрация не превышает наноМоли.

Последовательность аминокислотных остатков в молекуле альбумина человека гомологична с быком и крысой; во всех случаях первичная структура трех доменов белка неравнозначна. Первые два домена содержат больше ароматических аминокислотных остатков (тирозин, триптофан, гистидин). Единственный остаток триптофана в альбумине человека расположен в четвертой петле. В третьем домене снижено содержание аспарагиновой и глютаминовой кислот и общий заряд близок к нулю. Первые два домена имеют 7—9 отрицательных зарядов каждый, которые формируют общий заряд молекулы. Возможно поэтому при связывании и переносе альбумином разных по гидрофобности лигандов, функциональные домены задействованы не в равной мере.

Длинноцепочечные ЖК являются основным лигандом, который связывает альбумин (1—2 моль/моль). Иные лиганды образуют связи в молярном отношении < 0,05. Альбумин связывает пальмитиновую, стеариновую НЖК и олеиновую МЖК. Короткоцепочечные ЖК (< 8 атомов углерода) белок не связывает. Можно полагать, что ЖК взаимодействуют более чем с одним местом связывания. При взаимодействии с пальмитиновой НЖК in vitro гидролизованная С-треть цепи белка связывает ЖК столь же активно, как и целая молекула. Можно полагать, что петли 7—8 формируют те гидрофобные щели, в которые погружается цепь ЖК.

In vivo альбумин, свободный от ЖК, нестабилен и подвержен действию протеаз, повышенной температуры; способность белка связывать все лиганды становится низкой. Добавление одного моля пальмитиновой НЖК на моль альбумина восстанавливает стабильность и ассоциацию с другими лигандами. Молекула становится более сферичной; это подтверждает и измерение нативной флуоресценции триптофана. Поскольку концентрация ЖК в крови редко бывает ниже одного моля/моль альбумина, протективное влияние ЖК является постоянным. Возможно, что потеря альбумином способности связывать ЖК является одним из факторов, который контролирует его катаболизм.

Кооперативность связывания лигандов приводит к тому, что после ассоциации с альбумином пальмитиновой НЖК связывание билирубина возрастает в 2 раза. Ассоциация второй ЖК продолжает увеличивать сродство, но ассоциация третьей ЖК при избытке НЭЖК в среде in vitro ингибирует связывание билирубина и вытесняет из ассоциации ранее ассоциированные лекарственные препараты. Среди лекарств только фибраты (фенофибрат) могут конкурировать с ЖК за места связывания на альбумине при концентрации моль клофибрата/моль ЖК. Напомним, что клофибрат — это химически модифицированная ЖК. Клиренс НЭЖК в крови — быстрый; полупериод ассоциации с альбумином пальмитиновой НЖК составляет 4,5 мин. Поскольку ЖК из крови постоянно поглощают все инсулинзависимые клетки, константа скорости поглощения составляет 0,38 мин. При каждом кругообороте крови ткани поглощают 38% ассоциированных с альбумином НЭЖК.

Неэтерифицированные, свободные ЖК, структура и функция

мембраны клеток

В переносе ЖК in vivo задействован макроперенос (перенос ЖК в крови в форме ТГ в составе ЛП и в ассоциатах НЭЖК с альбумином), а также микроперенос (диффузия, облегченная диффузия ЖК через клеточную мембрану) (рис. 5.3) и трансцеллюлярный (межклеточный) перенос. Столь сложный перенос, вероятно, необходим при доставке к клеткам гидрофобных веществ. Перенос ЖК между ЛП и альбумином, поглощение ЖК клетками эндотелия с последующим их трансцитозом обеспечивает субстратами для наработки энергии глубоко расположенные слои стенки сосудов и другие ткани. Взаимодействие альбумин <-> лиганд является обратимым: между связанный <-» несвязанный лиганд устанавливается динамичное равновесие. Олеиновая МЖК, обладая высоким сродством к альбумину, вытесняет из связи многие иные лиганды. Дис-

дкффузкя Флип-флоп (переход)

Рис. 5.3. Облегченный перенос ЖК в форме лизофосфатидилхолинов из наружного монослоя во внутренний, согласно двум механизмам: переход

типа флип-флоп и путем латеральной диффузии

социация с белка позволяет лигандам (лекарствам) покинуть внутрисосудистое русло и оказаться в межклеточной среде. Связывая ЖК, альбумин уменьшает скорость их встраивания в наружный монослой плазматической мембраны.

У большинства людей при электрофорезе в геле агарозы альбумин представлен одной гомогенной фракцией. У гетерозигот можно встретить разные варианты дисальбуминемии. Изоэлектрическая точка для альбумина ниже, чем у большинства белков, составляя pH 4,3—4,8. При pH 7,4 отрицательный заряд молекулы белка равен 18. Микрогетерогенность молекулы альбумина может быть связана с взаимодействием с лигандами, явлениями полимеризации; имеются и генетические различия.

Две ЖК альбумин связывает с высокой аффинностью; константа связывания 1,0—2,6 • 108. Содержание альбумина в крови составляет 0,5—0,7 ммоль/л, ЖК — 0,5—0,8 ммоль/л. Более 90% ЖК физиологично связано с альбумином уже при константе связывания 104. Для чего же константа ассоциации на самом деле много выше? Вероятно, число участков связывания при этом остается прежним — два места для ЖК на молекуле альбумина. Глобула белка столь лабильна потому, что каждый из ее гидрофобных доменов сформирован из аминокислотных остатков, которые в цепи далеко отстоят друг от друга. При этом сформированные места связывания (гидрофобные домены) удерживает в третичной структуре только слабые, гидрофобные и силы ван-дер- Вальса. Такое строение глобулы позволяет понять механизмы кооперативности в альбумине при связывании лигандов, рис. 5.4.

На основании метода кругового дихроизма и расчета последовательности аминокислотных остатков альбумин содержит 45—55% а-спиральных структур и 15% [3-складчатых построений. Спиральные структуры формируют карманы, внутренняя поверхность которых является выраженно гидрофобной. На конце каждой длинной цепи имеется остаток пролина, лизина и аргинина. Этот домен расположен на поверхности молекулы и имеет положи-

а-слирапь 0-структура беспорядочный клубок

Рис. 5.4. Сравнение разных структур в молекуле протеинов, которые обеспечивают физико-химические свойства белков

тельный заряд, который ассоциируется с отрицательно заряженной карбоксильной группой ЖК. Остатки лизина и аргинина расположены на поверхности. Связываемые белком молекулы могут находиться в дискретных конформациях с разной биологической активностью.

Введение в вену НЭЖК в среде этилового спирта вызывает состояние шока и смерти животных. Преинкубация НЭЖК с альбумином предотвращает токсическое действие. При перфузии изолированного сердца мыши, при отсутствии в перфузате альбумина, СЖК (не связанные с альбумином) блокируют реакции окислительного фосфорилирования и проявляют цитотоксичное действие. НЭЖК изменяют функциональную активность клеток in vitro. Они:

  • а) ингибируют хемотаксис нейтрофилов;
  • б) активируют агрегацию тромбоцитов и
  • в) повышают поглощение клетками эндотелия молекул по механизму эндо-, экзо-цитоза, биологической реакции трансцитоза, нарушая функцию эндотелийзависимой вазодилатации;
  • г) ингибируют связывание Л ПН П с апоВ-100 рецепторами, препятствуя их поглощению фибробластами в культуре ткани. Биологическая реакция стресса и выраженная активация липолиза способствуют встраиванию в мембрану ЖК в форме прямых.

Альбумин и активация гидролиза ТГ в крови в составе ЛПОНП

Альбумин является акцептором продуктов реакции — НЭЖК в процессе липолиза в крови при действии постгепариновой ЛПЛ. В отсутствии альбумина гидролиз ТГ проходит медленно; субстратом для оценки липолиза in vitro является трибутирин. В присутствии фермента, апоС-П как кофактора ЛПЛ и альбумина как акцептора продуктов реакции, проходит гидролиз преимущественно С18:1 олеиновой МЖК, с более низкой константой реакции липолиз С 16:0 пальмитиновой и С 18:0 стеариновой НЖК. Альбумин слабо связывает С 18:2 линолевую ННЖК; возможно, происходит это путем низкоаффинной сорбции.

Уровень гидратации ЖК в везикулах определяют на основании нативной флуоресценции альбумина. Определен также уровень гидратации ЖК в их связи с альбумином; гидратация ЖК зависит от длины цепи и количества ДС. Повышение длины ЖК понижает уровень гидратации, в то время как увеличение степени ненасыщен-ности (числа ДС в цепи) повышает гидратацию протеинов в цитоплазме. Техника остановленного потока показала, что альбумин может связать две молекулы олеиновой МЖК. Микроскопические повреждения интимы артерий мышечного типа сопровождает выраженное проникновение в нее альбумина; монослой эндотелия является эффективным барьером, который препятствует выходу альбумина в ткани. Если нарушить целостность монослоя эндотелия, поврежденный участок его быстро выстилают тромбоциты; они активно препятствуют миграции альбумина в интиму артерий эластического типа.

Содержание альбумина в плазме крови в молярном отношении в 4 раза ниже концентрации Са++, в 2 раза — Mg++ и в 7—10 раз меньше глюкозы. Гепатоциты синтезируют белок в форме преальбумина, который ковалентно связан с сигнальным шестичленным пептидом, который присоединен к N-концу молекулы альбумина. Перед выходом из канальцев эндоплазматической сети происходит гидролиз шестичленного пептида и секреция в кровь уже альбумина. Особенностью структуры альбумина является формирование двойных петель, которые фиксированы S-S связями аминокислотных остатков цистеина. Такие структуры, с одной стороны, обеспечивают связывание гидрофобных лигандов; с другой — стабильность молекулы при действии денатурирующих агентов. Первичная структура позволяет понять анатомию и функцию молекулы, в которой каждая петлевая структура формирует функциональный домен; показано это методом кругового дихроизма.

НЖК и ННЖК в ассоциации с альбумином не могут быть смешаны, даже если они имеют цепи одинаковой длины; отличия сохраняются и в фазе жидкого кристалла. Это ставит под сомнение модель Л П, сформированную американскими биофизиками. Можно обоснованно говорить, что смешение индивидуальных ЖК и индивидуальных ТГ, тем более ТГс поли-ЭХС, с образованием гомогенной структуры невозможно; недостижимо это и при воздействии ультразвука, хотя временно видимой гомогенности добиться можно. Поэтому трудно понять рисунки, которые приведены во многих статьях и в которых в «ядре» Л ПЛ НПиЛПНПне изолированно располагаются ТГ и поли-ЭХС. Это nonsense; физико-химически это невозможно.

Исходя из этого, мы четвертью века ранее предложили иную структуру апоВ-100 Л П, в которых разные по гидрофобности ТГ, тем более поли-ЭХС, ассоциированы с разными доменами апоВ-100. Изменение отношения ТГ/поли-ЭХС является причиной формирования активной конформации апоВ-100, при которой на поверхности ЛПНП формируется апоВ-100 лиганд. Структурной особенность ЖК в ФЛ является то, что ацильные цепи «смотрят» в разные стороны. Твердая фаза образуется из ФЛ, если упаковать их в гексагональные структуры, когда полярные взаимодействия исключены, возможно, блокировано и взаимодействие между головными группами ФЛ, рис. 5.5.

Ежедневно из ВЖК и подкожных адипоцитов происходит мобилизация около 200 г ЖК. Это на три порядка выше возможности одномоментного связывания ЖК с альбумином. Белок предотвращает

Структура фосфатидилхолинов

Рис. 5.5. Структура фосфатидилхолинов:

1 — с двумя НЖК; 2 — симметричный ФХ с двумя ННЖК; 3 — ассиметричные ФЛ

с одной НЖК и одной ННЖК

ассоциацию ЖК с формированием жидкокристаллических или кристаллических агрегатов (мицелл) при нейтральном значении pH. С одной стороны:

  • а) альбумин ускоряет активное поглощение клетками ЖК, с другой,
  • б) предотвращает формирование ассоциатов ЖК в межклеточной среде при концентрации их в крови выше уровня образования мицелл. В межклеточной среде с альбумином ассоциировано до 99% НЭЖК. Однако и ЛП и плазматические мембраны клеток обладают сходной мерой аффинности по отношению к ЖК и к альбумину. При повышенной концентрации НЭЖК в крови последние активно встраиваются:
  • а) в полярный монослой ФХ:ХС на поверхности массы связанных с апоВ-100 триглицеридов в составе ЛИОНП;
  • б) в наружный, а далее и внутренний монослой бислойной плазматической мембраны клеток монослоя эндотелия.

Это происходит при симптомах резистентности к инсулину, сахарном диабете первого типа, при сепсисе, инфаркте миокарда, ги-пертиреозе, нефротическом синдроме и состоянии гипоальбуми-немии генетического генеза. Это происходит в ситуациях, когда ассоциация альбумина с НЭЖК может быть существенно изменена: состояние метаболического ацидоза, большие дозы лекарств, ассоциированных с альбумином, неферментативное гликирование альбумина и выраженная гипербилирубинемия при неалкогольной жировой болезни печени и вирусных гепатитах в стадии атрофического цирроза печени. Отношение ЖК/альбумин снижено при низкой секреции инсулина и состоянии диабетического кетоацидоза.

При оценке связывания ЖК с альбумином необходимо соблюсти все условия: температура, состав белков, концентрация солей и альбумина. Снижение в крови концентрации Са++ изменяет конформацию альбумина. Ассоциация НЭЖК с альбумином человека, монослоем ФЛ, с везикулами и нативными ЛП зависит от отношения ЖК/альбумин. При молярном отношении 1 : 1 ЖК ассоциируются с альбумином, занимая высокоаффинные места связывания. При большем молярном отношении ЖК ассоциируются и с полярным монослоем ФХ : ХС на поверхности массы гидрофобных ТГ в составе ЛПОНП. Аффинность альбумина является низкой по отношению к ЖК с длиной цепи С20 и более. Однако уже вторую, тем более третью пальмитиновую НЖК альбумин связывает с меньшей аффинностью, чем первую; функциональное негативное отношение проявляет альбумин и по отношению к ПНЖК.

Альбумин связывает только отрицательно заряженные НЭЖК; незаряженные НЭЖК свободно встраиваются в плазматическую мембрану клеток. Это происходит при нефротическом синдроме, кетоацидозе, биологической реакции стресса, при выраженной адре-нэргической стимуляции. Чем более выражен метаболический ацидоз:

  • а) тем меньше альбумин в межклеточной среде связывает НЭЖК;
  • б) тем больше НЭЖК находятся в межклеточной среде в самоас-социации с иными НЭЖК в форме мицелл, формируя фракцию не связанных с альбумином НЭЖК, фракцию свободных СЖК.

Физико-химически, биологически наличие в межклеточной среде пула СЖК является явно нежелательным.

Два пула неэтерифицированных ЖК в межклеточной среде,

пул НЭЖК и пул СЖК

НЭЖК представлены в плазме крови двумя динамичными пулами: а) НЭЖК в ассоциации с альбумином и б) НЭЖК, которые циркулируют в виде мицеллярных структур, пул СЖК. Альбумин связывает только отрицательно заряженные, диссоциированные ЖК, которые лишены протона — Н+. Для поглощения ЖК мембраной клеток требуется их диссоциация из связи с альбумином. Диссоциация ЖК является катализируемой при взаимодействии альбумина с клеточной мембраной. Освобождение ЖК из ассоциации с альбумином не превышает скорость их диффузии через клеточную мембрану. Диссоциация ЖК с альбумином происходит быстрее, чем они диффундируют через мембрану. Вместе с тем явно каталитических, химических реакций при этом не происходит. Предполагают, что ЖК не столь просто покидают альбумин и встраиваются в мембрану, поскольку для диссоциации, которая сопровождает изменение конформации молекулы белка, требуется энергия.

Альбумин, вероятно, взаимодействует со специфичными доменами на мембране — гидрофобными кластерами, с рафтами — плотами. Диссоциация альбумина с олеиновой МЖК является лимити-

рующим этапом в последующем связывании белка с мембраной клеток; это предполагают наличие рецепторов к альбумину. Ранние позвоночные альбумина не имеют. У высших позвоночных есть альбумин и рецепторы к нему. Теория рецепторов к альбумину полагает, что диссоциацию ЖК с альбумином катализирует взаимодействие белка с плазматической мембраной.

Диссоциацию ЖК активирует связывание альбумина с более гидрофобной поверхностью. Способность альбумина связываться с гидрофобными доменами на мембране определена конформацией, которую белок принимает в ассоциации с лигандами. Вероятно, на плазматической мембране клеток альбумин + НЭЖК ассоциируется с гидрофобными доменами мембраны, с плотами (рафтами) с более высокой гидрофобностью.

Липидный плот — микродомен плазматической мембраны клеток, обогащенный ХС и насыщенными ФЛ — сфинголипидами. Образно говоря, это кластер плотно упакованных липидов, который «плавает» в окружении менее гидрофобного ФХ. Размеры плота — 50—200 нм. Встраивание интегральных белков в плот способствует его стабилизации; связывание лигандов с рецепторами, приводит к латеральной диффузии и слиянию плотов, запуская при этом и передачу внутриклеточного сигнала. Липидные плоты — фракция липидов мембраны клеток, устойчивой к действию неионного детергента (тритон X-100) при температуре +4°С, рис. 5.6.

Строение плота клеточной мембраны

Рис. 5.6. Строение плота клеточной мембраны:

  • (А) цитоплазма; (В) внешняя среда; 1 —липиды в жидкой неупорядоченной фазе окружают плот — 2; 3 — трансмембранный белок в плоте; 4 — белок клеточной мембраны; 5 — цепи олигосахаридов гликопротеинов; б — гликозилфосфатидилинозитол;
  • 7 — ХС; 8 — гликолипиды.

В этих условиях мембрана из ФХ в жидкой, неупорядоченной фазе растворяется, а липиды в жидкой, упорядоченной фазе сохраняют структуру. Эта относительная устойчивость к растворению использована изначально как фактически характеристика липидного плота. Важная роль ХС для образования плота показана при обработке мембраны циклодекстрином. Сорбент, связывая полярный ХС и удаляя его из липидной мембраны, инициирует растворение плотов в окружающих молекулах ФХ. Некоторые белки специфично локализованы только в липидных плотах; это протеины с глицерофосфа-тидилинозитолом и трансмембранные белки. Иные белки встраиваются в плоты только после того, как они активированы (рецепторы Т- и В-клеток, СЭ36 транслоказа), рис. 5.7.

Альбумин связывается не только с гепатоцитами, но с гидрофобными доменами других клеток; окисление ЖК в инсулинозависимых кардиомиоцитах зависит от активности переноса ЖК. Диссоциация ЖК с альбумином — лимитирующий этап клиренса их из межклеточной среды, поглощения их клетками. Альбумин в физиологичной концентрации может формировать нековалентные, лабильные димеры. Диссоциация АЛБ <-» НЭЖК не является спонтанной; не является она и очень быстрой. Взаимодействие альбумина с мембраной рассматривают как функцию специализированных доменов. Первичное место, отведенное для связывания пальмитиновой НЖК — 7—9 петля С-конца молекулы. Альбумин связывает одну, две НЖК + + МЖК, третий домен обычно занят менее гидрофобными лигандами — билирубином. Использование меченого белка показало наличие аффинных мест связывания на мембране гепатоцитов для комплекса альбумин + НЭЖК; физиологично всего не более 1% НЭЖК в межклеточной среде не связано с альбумином.

Альбумин активно связывает НЖК и МЖК и слабо ассоциируется с линоленовой ННЖК. Альбумин новорожденных слабо связывает пальмитиновую НЖК. Олеиновую МЖК и стеариновую НЖК клетки поглощают путем диффузии через бислой мембраны. С8 ЖК в клетку не поступает; вероятно, по причине недостаточной гидро-фобности. Метилирование пальмитиновой НЖК предотвращает ее

А — плоты — липидные домены в бислойной липидной мембране

Рис. 5.7. А — плоты — липидные домены в бислойной липидной мембране;

использование метода сканирующей зондовой микроскопии;

Б — профиль плотов

ассоциацию с альбумином и поглощение клетками. Перенос через мембрану не требует затрат АТФ; при этом проназа, но не трипсин, ингибирует пассивное поглощение клетками НЭЖК. Это дает основание полагать наличие специфичных белков, которые вовлечены в процесс поглощения клетками ЖК. Поглощение ЖК клетками происходит быстро, но механизм переноса остается неясен. Гидрофобные и полярные ЖК встраиваются и диффундируют через бислой ФЛ при действии СЭ36 транслоказы.

Далеко не все исследователи придерживаются теории простой диффузии. Показано, что окисление ЖК в гепатоцитах снижается при обработке клеток трипсином, как и при добавлении в среду а-Вг-пальмитиновой НЖК. Поглощение ЖК скелетными миоцитами и кардиомиоцитами — процесс насыщаемый: скорость поглощения ЖК клетками во многом определяет скорость их окисления в митохондрии. Поступление ЖК в клетку удается блокировать фло-ретином; он ингибирует поглощение НЭЖК клетками на уровне транспорта в плазматической мембране клеток. Поступление в клетку олеиновой МЖК из ассоциатов с альбумином — насыщаемый процесс. В то же время, при афизиологично высокой концентрация в крови СЖК, клетки медленно поглощают ее путем пассивной диффузии. Этот процесс отражает простую диффузию НЖК и МЖК через бислой ФЛ. При этом концентрация встроенных ЖК в наружный монослой плазматической мембраны может быть существенно выше, чем во внутреннем.

Конкуренция между разными ЖК за поглощение их адипоцитами является доказательством специфичности транспорта через мембрану. Эту конкуренцию можно использовать для определения структуры, которая необходима для переноса; альбумин связывает каждую ЖК с разной величиной константы связывания. Стеариновая НЖК ингибирует поглощение клетками олеиновой МЖК. Метилирование карбоксильной группы выраженно снижает поглощение клетками линолевой ЖК; альбумин практически не связывает метиловые эфиры ЖК. В мкМ содержание в крови ЖК и альбумина примерно одинаково (400—500 мкМ) и молярное отношение в норме составляет 0,4— 1,1. В физиологичных условиях концентрация СЖК составляет не более 1,0 мкМ. Максимальная скорость поглощения клетками ЖК составляет 0,6-2,5 нмоль/мин 10 млн клеток. Это сопоставимо с поглощением адипоцитами глюкозы (0,02 нмоль в норме и 1,0 нмоль при действии инсулина). Создается впечатление, что, как и для глюкозы, поступление в клетки ЖК при необходимости может быть увеличено.

При низких концентрациях ЖК в среде стеариновая НЖК ингибирует поглощение клетками олеиновой МЖК; при высоких концентрациях ЖК это не происходит. Видимо, в местах связывания с низкой аффинностью олеиновая МЖК удерживается более стабильно, чем стеариновая НЖК. Для транспорта через мембрану ацильная цепь ЖК не может быть короче, чем С 10. Обработка клеток проназой ингибирует окисление ЖК в митохондриях адипо-цитов в большей мере, чем в кардиомиоцитах. Возможно, поступление ЖК в клетки происходит по-разному.

Из внутреннего монослоя липидов мембраны ЖК связывают и втягивают в цитозоль специфичные транспортные белки; связывание ЖК происходит пропорционально содержанию их в мембране. Ковалентное связывание ЖК с транспортным белком, меченным флуорофором, позволило установить коэффициент диссоциации; для олеиновой МЖК — 0,33, для линолевой ННЖК — 0,97, линоле-новой ННЖК — 1,6 и Арахи ПНЖК — 2,5 мкМ. Константа диссоциации соответствует растворимости ЖК в воде. При ассоциации с транспортным белком, как и с альбумином, остается пул СЖК. Цитоплазматический белок может выполнять функцию альбумина. Это небольшой 15 кДа протеин, первичная структура которого варьирует в зависимости от вида клеток; третичная является сходной.

Измерение концентрации НЭЖК в клинической биохимии за последние 40 лет претерпело существенные изменения. Сам автор вначале измерял содержание НЭЖК путем формирования медного мыла в реакции с триэтаноламином, после экстракции определяя в нем содержание ионов Си++ в реакции комплексонообразования с диэтилдитиокарбаматом, качественным реактивом на ионы меди. Это реакция Дункомба. Далее последовал метод Долла — титрование сыворотки крови сантимолярным едким натрием — NaOH. И только через десятки лет был разработан энзиматический, колориметрический метод определения НЭЖК + СЖК в реакции с липоксиге-назой. Содержание НЭЖК заслуживает того, чтобы его в клинической биохимии измеряли более часто. В следующих работах мы изложим этиологические факторы и патогенез основной патологии, которая обусловлена in vivo нарушением метаболизма НЭЖК + + СЖК, и это будет столь широко распространенный «метаболический» синдром. В странах Средиземноморья низка заболеваемость атеросклерозом, но распространенность «метаболического» синдрома является высокой.

 
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ     След >