Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow Агропромышленность arrow Практикум по клинической диагностике с рентгенологией

БИОХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ СЫВОРОТКИ КРОВИ

В ветеринарной практике широкое распространение получило биохимическое исследование крови. Биохимические показатели крови определяют с целью профилактики заболеваний (и тогда исследование носит плановый характер), с диагностической целью или для контроля за результатами лечебных мероприятий.

В современной лабораторной практике используют различного рода автоматические анализаторы, но по-прежнему, особенно при слабой технической оснащенности, применяют унифицированные методы биохимического исследования.

Определение содержания общего белка и резервной щелочности крови

Цель занятия. Научиться определять резервную щелочность крови, а также содержание общего белка. Приобрести навыки диагностической оценки полученных результатов.

Объекты исследования и оборудование. Сыворотка крови.

Фотоэлектроколориметры, рефрактометр, градуированные пипетки на 1 и 2 мл, бюретки на 5 и 10 мл, глазные пипетки, сдвоенные колбы общим объемом около 80 мл и с отверстиями диаметром 16, 18 или 20 мм в зависимости от размера резиновых пробок (№ 16, 18 или 20).

Реактивы для определения резервной щелочности: 0,1 н. и 0,01 н. растворы гидроксида натрия, 0,1 н., 0,01 н. и 5%-й растворы серной кислоты, 1%-й спиртовой раствор фенолфталеина.

Определение содержания общего белка рефрактометрическим методом. Используют рефрактометры типа ИРФ-1, ИРФ-22 ИРФ-23, ИРФ-454, РЛУ, РПЛ и др.

Прибор готовят к работе следующим образом: на поверхность измерительной призмы наносят одну-две капли дистиллированной воды; устанавливают резкость лупы шкалы и окуляра зрительной трубки. Линию, нанесенную на лупе шкалы, совмещают с делением 1,3333, а границу светотени с помощью ключа — с точкой пересечения визирных линий.

Подготовив прибор, раскрывают его камеру, протирают верхнюю и нижнюю призмы сначала фильтровальной бумагой, затем мягкой салфеткой. На поверхность нижней призмы наносят одну-две капли сыворотки, камеру закрывают, направляют свет в ее окно и поворачивают рукоятку до тех пор, пока граница светотени не установится в точке пересечения визирных линий. По шкале отсчитывают показатель преломления сыворотки. Пользуясь данными таблицы, по коэффициенту преломления определяют содержание белка (табл. 8.1).

Коэффициенты преломления сыворотки крови и соответствующее им количество общего белка

Таблица 8.1

Коэффициент

преломления

Белок, г/л

Коэффициент

преломления

Белок, г/л

Коэффициент

преломления

Белок, г/л

Коэффициент

преломления

Белок, г/л

I

2

3

4

5

6

7

8

1,3427

39,4

1,3481

71,0

1,3511

88,2

1,3541

104,9

1,3431

41,6

1,3482

71,5

1,3512

88,7

1,3542

105,4

1,3435

43,8

1,3483

72,0

1,3513

89,2

1,3543

106,0

1,3439

46,0

1,3484

72,5

1,3514

89,7

1,3544

106,4

1,3443

48,1

1,3485

73,1

1,3515

90,3

1,3545

107,0

1,3446

50,3

1,3486

73,6

1,3516

90,8

1,3546

107,5

1,3450

52,5

1,3487

74,2

1,3517

91,4

1,3547

108,0

1,3454

54,7

1,3488

74,8

1,3518

92,0

1,3548

108,8

1,3458

56,8

1,3489

75,4

1,3519

92,6

1,3549

109,0

1,3460

59,2

1,3490

75,9

1,3520

93,5

1,3550

109,8

1,3461

59,7

1,3491

76,3

1,3521

94,1

1,3551

110,4

1,3462

60,2

1,3492

76,8

1,3522

94,6

1,3552

110,9

1,3463

60,7

1,3493

77,3

1,3523

95,1

1,3553

111,5

1,3464

61,2

1,3494

77,9

1,3524

95,7

1,3554

112,1

1,3465

61,8

1,3495

78,3

1,3525

96,3

1,3555

112,6

1,3466

62,3

1,3496

79,1

1,3526

96,8

1,3556

113,0

1,3467

62,9

1,3497

79,6

1,3527

97,3

1,3557

113,7

1,3468

63,4

1,3498

80,6

1,3528

97,8

1,3558

114,2

1,3469

64,0

1,3499

81,2

1,3529

98,4

1,3559

114,7

1,3470

64,5

1,3500

81,7

1,3530

98,9

1,3560

115,2

1,3471

65,0

1,3501

82,3

1,3531

99,4

1,3561

115,7

1,3472

65,5

1,3502

82,8

1,3532

99,9

1,3562

116,2

1,3473

66,0

1,3503

83,3

1,3533

100,5

1,3563

116,7

1,3474

66,5

1,3504

83,8

1,3534

101,0

1,3564

117,1

1

2

3

4

5

6

7

8

1,3475

67,1

1,3505

84,4

1,3535

101,7

1,3565

117,7

1,3476

67,7

1,3506

84,9

1,3536

102,3

1,3566

118,2

1,3477

68,2

1,3507

85,5

1,3537

102,8

1,3567

118,7

1,3478

68,8

1,3508

86,1

1,3538

103,3

1,3568

119,3

1,3479

69,3

1,3509

87,1

1,3539

103,9

1,3569

119,8

1,3480

70,4

1,3510

87,6

1,3540

104,4

1,3570

120,4

У здоровых животных содержание общего белка в сыворотке крови находится в следующих пределах, г/л: у крупного рогатого скота 72—86; овец 60—75; свиней 65—85; лошадей 65—78; собак 59—76; кошек 59—73; кроликов 60—82; кур 43—59.

Уменьшение концентрации общего белка в сыворотке крови — гипопротеинемия — встречается при низком содержании белка в рационе, несбалансированности рациона по аминокислотному составу, при беременности, острых и хронических кровотечениях, гидремии, в результате потери белка при гастроэнтеропатиях, острых ожогах, нефротическом синдроме; снижении биосинтеза белка вследствие хронических заболеваний печени (гепатит, цирроз, тейлериоз), при синдроме нарушенного всасывания, перитоните, злокачественных новообразованиях, сепсисе, лихорадочных состояниях, интоксикации.

Увеличение содержания общего белка в сыворотке — гиперпроте- инемию — наблюдают при концентратном типе кормления, избытке в рационе переваримого протеина и недостатке углеводов, дегидратации, сахарном диабете, диарее, гипериммуноглобулинемии, венозном стазе, флегмонах, сепсисе.

Определение резервной щелочности крови. При определении показателей, характеризующих кислотно-основное равновесие, наиболее совершенным считают метод Аструпа (1956), модифицированный Зиггард — Андерсеном (1963). С помощью данного метода определяют pH, парциальное давление диоксида углерода (рС02), щелочной резерв (способность крови связывать С02), истинный бикарбонат, стандартный бикарбонат, буферные основания и общее содержание диоксида углерода в плазме. В практической работе состояние кислотно-основного равновесия оценивают по результатам определения щелочного резерва плазмы крови по Ван-Слайку или сыворотки (плазмы) по И.П. Кондрахину. Сыворотку (плазму) хранят под вазелиновым маслом.

При определении резервной щелочности сыворотки крови по И.П. Кондрахину в одну половину сдвоенной колбы вносят 0,5 мл сыворотки (плазмы) крови, причем выдувать остатки жидкости из пипетки нельзя; плотно закрывают пробкой. Во вторую половину колбы берут 2 мл 0,01 н. раствора гидроксида натрия, закрывают пробкой. Затем открывают первую половину колбы, к находящейся там сыворотке крови добавляют 1 мл 5%-го раствора серной кислоты и быстро закрывают пробкой. Вращательными движениями тщательно смешивают сыворотку с кислотой. За время прохождения реакции пробу перемешивают 3—4 раза.

В контрольную колбу вносят 2 мл 0,01 н. раствора гидроксида натрия и плотно закрывают пробкой. Во вторую половину сдвоенной колбы вносят 1 мл 5%-го раствора серной кислоты и закрывают пробкой. Прежде чем закрыть отверстия колбы, пробки увлажняют дистиллированной водой.

Для большей точности каждый образец сыворотки исследуют в двух сдвоенных колбах. Контрольный опыт ставят в трех сдвоенных колбах.

Через 4—6 ч (допустимо до 12 ч) открывают колбы, в которых находится раствор гидроксида натрия, вносят одну каплю 1%-го спиртового раствора фенолфталеина, смешивают (цвет изменится на красный). Затем жидкость в колбе титруют 0,01 н. раствором серной кислоты до полного обесцвечивания, что происходит при pH 8,0. Титровать следует осторожно и одинаково быстро все пробы и контроль.

Показатель рассчитывают по формуле:

где Трщ — резервная щелочность (в объемных процентах С07); а —количество 0,01 н. раствора серной кислоты, израсходованное на титрование опытной пробы, мл; б— количество 0,01 н. раствора серной кислоты, израсходованное на титрование контрольной пробы, мл; 0,224 — коэффициент пересчета 0,01 н. раствора серной кислоты на С02 при данной реакции; 200 — коэффициент пересчета взятого для анализа количества сыворотки (плазмы) крови (0,5 мл) на 100 мл.

У здоровых животных резервная щелочность сыворотки крови составляет, об.% С02: у крупного рогатого скота 46—66; мелкого рогатого скота 48—60; свиней 45—55; лошадей 50—65; кур 48—55.

Кислотная емкость крови находится в пределах, ммоль/л: у крупного рогатого скота 115—145; овец 115—130; коз 95—130; лошадей 125— 150; свиней 125—150; собак 110— 135.

При нарушениях кислотно-основного равновесия могут наблюдать ацидоз — избыток кислот или недостаток оснований; алкалоз — избыток щелочных веществ. Если ацидоз или алкалоз не сопровождаются сдвигом pH, то их называют компенсированными, а если отмечен сдвиг pH, — некомпенсированными. Ацидоз и алкалоз могут быть газовыми (дыхательными) и негазовыми (метаболическими).

Газовый ацидоз возникает вследствие задержки в организме угольной кислоты, что наблюдают при бронхите, бронхиальной астме, эмфиземе легких, пневмонии, механической асфиксии, опухолях легких, недостаточности кровообращения.

Метаболический ацидоз возникает при обильном кормлении животных кислыми кормами, концентратами, при скудном кормлении, кетозе, остеодистрофии, рахите, послеродовом парезе, сахарном диабете, диспепсии, атонии преджелудков, нефритах, лучевой болезни, лихорадках.

Газовый алкалоз отмечают при выраженной гипервентиляции легких (перегревание организма, анемия, отравление СО, энцефалит, опухоли мозга).

Метаболический алкалоз проявляется при избыточном введении щелочных эквивалентов, обильном кормлении сахарной свеклой, рвоте, кардиоспазме, силикозе, бабезиозе (пироплазмозе), гипофункции паращитовидных желез, после применения диуретиков.

 
Посмотреть оригинал
Если Вы заметили ошибку в тексте выделите слово и нажмите Shift + Enter
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ ОРИГИНАЛ   След >
 

Популярные страницы