Современные методы количественного определения плесневых грибов

Методы посева. Образец взвешивают, смешивают с разбавителем и помещают на агар, после чего чашки инкубируют при заданной температуре в течение 5 сут. Одновременно подсчитывают плесени и дрожжи, так как плесени вполне отличимы от дрожжей по характерным гифам. Масса образца может составлять от 5 до 400 г; образец смешивают с 0,1 %-м понтонным бульоном и разбавляют в пропорции 1 : 10 или 1:5. Любой фрагмент мицелия, имеющий неповрежденные ядро и споры, способен образовывать колонии.

Для количественного определения плесеней используют несколько сред, поскольку универсальной среды до сих пор не разработано. Рекомендуется использовать агар Чапека, декстрозный агар Сабуро, глюкозный агар на основе дрожжевого экстракта, агар на солодовом экстракте, питательную среду общего назначения — агар для определения микробного числа с добавлением по 100 мг хлорамфеникола и хлортетрациклина.

Следует отметить: одно из ограничений методов количественного определения плесеней состоит в том, что не существует одной универсальной среды для выделения и количественного определения всех видов плесеней для всех возможных пищевых продуктов. Поэтому рекомендуется применять различные культуральные среды.

Поскольку в большинстве пищевых продуктов может развиваться несколько видов плесеней, для микологического анализа таких продуктов может потребоваться несколько сред и разные условия инкубирования, особенно если требуется определить не только их количество. Еще одним лимитирующим фактором является отсутствие единых правил по выбору антибиотика для подавления размножения бактерий.

Методы фильтрации. Сущность метода, в котором применяется гидрофобный мембранный фильтр, заключается в том, что в процессе фильтрации жидкий образец (или твердый в растворе) проходит через фильтрующий элемент с предварительным фильтром (размер пор — 5 мкм; используется для удаления частиц пищевого продукта). За первым расположен второй мембранный фильтр (размер пор — 0,45 мкм) с гидрофобной сеткой, способный улавливать отдельные клетки. Этот фильтрующий элемент помещают в чашку Петри на агар КМ-11, содержащий краситель-индикатор и антибиотик, и проводят инкубирование при температуре 25 ± ГС в течение 50 ± 2 ч, после чего подсчитывается количество ячеек с колониями.

Методы подсчета гифов по Ховарду. Данный метод основан на стандартизированном методе, с помощью которого вычисляется процент микроскопических полей с гифами плесени, которые превышают по размеру 1/6 диаметра поля. Перед тем как использовать данный метод, необходимо научиться различать клеточную ткань продукта, не содержащего плесени, структуры инородных включений животного или растительного происхождения и собственно плесени. Гифы плесени состоят из продольных трубок, поперечных перегородок, разделяющих гиф на отдельные участки, клеточного материала в форме гранул, разветвлений гифов, их концов, не способных преломлять свет, однако не в каждом образце все они присутствуют.

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ     След >