СРЕДЫ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АЭРОБНЫХ И ФАКУЛЬТАТИВНО-АНАЭРОБНЫХ ТЕРМОФИЛЬНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ

Картофельно-пептонный бульон (агар)

Состав среды: 20%-й картофельный отвар 1 л, пептон 5 г, агар 15-25 г, хлорид натрия 5 г; pH 7,0-7,2.

200 г картофеля, очищенного и нарезанного кусочками, заливают 1 л водопроводной воды, кипятят в течение 15—20 мин, не допуская разваривания клубней, фильтруют через ватно-марлевый фильтр и доводят объем фильтрата до первоначального. В фильтрате растворяют пептон, хлорид натрия и расплавляют при нагревании агар. Устанавливают требуемую величину pH. Разливают в колбы и пробирки и стерилизуют в течение 30 мин при температуре 125 °С. Рекомендуется контролировать стерильность среды, термостатируя ее при температуре 55 °С в течение 24 ч.

Среда Смиса—Лоренца

Состав среды: пептон, триптон, или триптоза (Дифко), 10 г, глюкоза 5 г, агар 20 г, растворимый крахмал 5 г, бромкрезол-пурпур 0,4%-й водный раствор 10 мл, вода водопроводная 1 л; pH 7,0—7,2.

Все составные части растворяют в 950 мл водопроводной воды. Крахмал растворяют отдельно в 50 мл воды и вносят его в среду. Устанавливают pH. Разливают и стерилизуют при температуре 117 °С в течение 20 мин.

Мясопептонный бульон (МПБ) с растворимым крахмалом

Состав среды: пептон 10 г, хлорид натрия 5 г, крахмал растворимый 10 г, мясной отвар до 1 л; pH 7,2. К мясному отвару добавляют пептон, хлорид натрия и крахмал, растворенный в 100 мл дистиллированной воды. Объем среды доводят до 1 л мясным отваром, разливают и стерилизуют при температуре 120 °С в течение 20 мин.

Среда с триптофаном

Состав среды: пептон 10 г, триптофан 500 мкг, глюкоза 5 г, растворимый крахмал 5 г, агар 20 г, 0,04%-й водный раствор бромкрезолпурпура 10 мл, водопроводная вода 1 л; pH 6,7-6,8.

Пептон растворяют в небольшом количестве воды, добавляют крахмал, предварительно растворенный в 50 мл воды и доводят объем водой до 1 л; устанавливают pH 6,7—6,8. Фильтруют через бумажный фильтр, добавляют триптофан, глюкозу, агар, индикатор, нагревают до полного растворения агара, разливают по стерильным колбам и стерилизуют в течение 20 мин при температуре 117 °С.

Приготовление индикатора. Для приготовления индикатора бромкрезолпурпура применяют бромкрезолпурпур 0,1 г, NaOH '/го н- раствор 3,7 мл, воду дистиллированную 25 мл. Индикатор взвешивают на аналитических весах, растирают в ступке (желательно агатовой) с соответствующим количеством гидроксида натрия.

К первичному щелочному раствору индикатора добавляют 25 мл дистиллированной воды и получают 0,4%-й раствор. Раствор хранят на холоде в стеклянном сосуде с притертой пробкой. Бромкрезолпурпу- ровый индикатор изменяет окраску в диапазоне pH 5,2—6,3, он становится бледно-желтым в кислых средах и красно-фиолетовым в нейтральных, давая зеленую с пурпурным оттенком окраску при pH 6,3.

Кислый протеозо-пептонный бульон (агар)

Состав среды: пептон 5 г, триптофан 500 мг, дрожжевой автолизат 135 мл, глюкоза 5 г, К2НР04 4 г, дистиллированная вода 500 мл; pH 5,0.

Составные части растворяют в воде и доводят pH до 5,0. Смесь разливают в колбы по 50 мл. В отдельную колбу к 500 мл дистиллированной воды добавляют 20 г агара и нагревают при температуре 100 °С до его растворения. Оба раствора стерилизуют в течение 20 мин при температуре 120 °С. Перед посевом агар расплавляют, охлаждают до температуры 50 °С, смешивают с таким же объемом среды и заливают посевы на чашках.

Приложение 10

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ     След >