Выбор вариантов ВЭЖХ в зависимости от природы определяемых веществ

Выбор различных вариантов ВЭЖХ для определения конкретных образцов зависит от природы определяемых веществ (их молекулярной массы, растворимости в водных и неполярных средах, способности образовывать ионы при диссоциации и др.).

Схема, показывающая принцип подбора соответствующего хроматографического метода для решения конкретной аналитической задачи, приведена на рис. 5.93.

Аппаратура в высокоэффективной жидкостной хроматографии

Жидкостный хроматограф является более сложным аналитическим прибором по сравнению с газовым. Это связано с тем, что система подачи элюента включает дополнительные узлы: блок дегазации, устройство для создания градиента, насосы, систему поддержания и измерения давления.

Насосы обеспечивают постоянную скорость потока элюента от 0,1 до 10 см3/мин при давлении до 400 атм. Для удаления газов из растворителей применяются специальные дегазаторы. Эта процедура необходима ввиду того, что появление пузырьков газа в детекторе делает невозможным его использование.

В жидкостной хроматографии различают изократический и градиентный режимы элюирования. В изократическом режиме через

Схема выбора метода хроматографирования для различных объектов

Рис. 5.93. Схема выбора метода хроматографирования для различных объектов

Источник: Евгеньев М.И., Евгеньева И.И., Герасимов М.К. Методы исследования свойств сырья и продуктов питания: Учеб, пособие. Казань: Изд-во ДАС, 2000. С. 20

колонку непрерывно пропускают подвижную фазу постоянного состава. При градиентном элюировании состав подвижной фазы в ходе разделения меняется согласно специально задаваемой программе. Можно, например, непрерывно изменять полярность элюента, изменяя относительные содержания компонентов в водно-мета- нольной смеси. Это позволяет значительно сократить время разделения, улучшить параметры разделения.

В методе ВЭЖХ применяют стандартные прямые колонки длиной 10, 15, 25 см с внутренним диаметром 4—5,5 см.

В ВЭЖХ используют два основных принципа детектирования. Первый заключается в измерении какого-либо общего свойства подвижной фазы, например показателя преломления или электропроводности. Этот способ детектирования является неселективным и потому универсальным. Второй принцип основан на измерении какого-либо специфического свойства разделяемых веществ — све- топоглощения в УФ-области, интенсивности флуоресценции или силы тока при электролизе вещества на рабочем электроде. Этот способ детектирования обладает более высокой селективностью и зачастую более низкими пределами обнаружения.

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ   ОРИГИНАЛ     След >